Application of Dried Blood Spot Testing for Hepatitis C Virus RNA Amplification

نهاد أحمد فؤاد; أحمد وجيه مهدي; شريف محمد الطاهر

doi:10.12816/0004921

Article Details

Application of Dried Blood Spot Testing for Hepatitis C Virus RNA Amplification

Authors:

نهاد أحمد فؤاد | أحمد وجيه مهدي | شريف محمد الطاهر

Publisher:

The Egyptian Society of Medical Microbiology

Main Topics:

Medicine

Journal:

The Egyptian Journal of Medical Microbiology 2013 Vol.22 Issue 1, pp.1-8

Document Type:

Article

Publication Date:

1/2013

Document Language:

English

Document ID (Org No.):

49197

Frequency:

Quarterly

pISSN:

11102179

DOI:

10.12816/0004921

Descriptors:

Abstract:

 Background/Aim: Hepatitis C Virus (HCV) infection represent a major public health problem because of the ability of HCV to cause a chronic carrier state. Even though chronic carriers remain largely asymptomatic, a large number of these individuals subsequently develop cirrhosis and primary hepatocellular carcinomas. Dried Blood Spot (DBS) samples are a simple and inexpensive sampling method, especially useful for blood collection in resource poor settings with limited access to diagnostic facilities. The main advantage of DBS samples over routine blood samples is that only a small quantity of blood is required, easy to obtain, stable and can be transported to a reference laboratory at minimal cost. 
The Aim of the work was to evaluate the feasibility of DBS samples as an alternative sample type to serum for the detection of HCV RNA. Results obtained from DBS samples were compared with results of serum using the same technique. 
Methods: This study was carried out on 50 anti-HCV–positive serum samples, from patients whom attending Arar Central Hospital and Prince Hospital, Arar, kingdom of Saudi Arabia., during November 2011 to February 2012. . 
Results: .HCV RNA was detected in 49/50 (98%) of the DBS samples, with Sensitivity 98% and Specificity 100 %, in comparisons to serum samples. Also there was no statistical significant difference in hepatitis C viral load between the two different samples among the patients. We demonstrated that there is no statistical significant different between the two samples when viral load is both less than and also more than 100000 IU. 
Concluded that the use of DBS for extraction and amplification of HCV RNA was reliable, specific, sensitive, cheap and appropriate method to monitor the HCV infected patients.

 يمثل التهاب الكبدي الوبائي (سي) مشكلة صحية كبيرة مع ما يقرب من 3٪ من سكان العالم وهذا يمثل أكثر من 170 مليون شخص مصاب. في حين أن 20-30٪ فقط من الأشخاص الذين تعرضوا لفيروس (سي) يتعافواتلقائيا فان ما تبقى من 70 -80٪ يتطور المرض ليصل للصوره المزمنة . وان حوالي 3-11٪ من هؤلاء الناس يتطور المرض عندهم مسببا تليف الكبد والمخاطر المرتبطة به من فشل الكبد وسرطانه.
وهدفت هذه الدراسه الى تقييم استخدام عينات نقطه الدم المجفف كنموذج بديل للسيرم للكشف عن الحمض النووي الريبي سي و مقارنة تلك النتائج بعينات السيرم وذلك باستخدام نفس الطريقه.
وقد شملت الدراسه 50مريضا بمرضى التهاب الكبدي الوبائي سي بمستشفى عرعر المركزي ومشتشفى الامير بمدينه عرعر ,المملكه العربيه السعوديه.،وكانوا ايجابيون للاجسام المضادة للفيروس (سي) وذلك خلال شهر نوفمبر 2011 إلى ابريل2012. وقد تم اختيار عشرة عينات سلبيه للاجسام المضادة للفيروس (سي) كضوابط سلبية.
كما تم اخذ 2-3 مل دم من الوريد من نفس المريض وفصل السيرم منه بعد تجلطه وتخزينه في -20 درجة مئوية , كذلك وخز اصبع المريض و الحصول على 50 ميكرون من الدم رصدت على بطاقه بروتين التوقف ™ ® 903 (Whatman) بواسطة ماصة ,تم تعريضها للهواء حتى تجف ، ثم وضعها في كيس من البلاستيك مقفل وتخزينها في -20 درجة مئوية .
تم استخدام عينات السيرم للكشف عن الاجسام المضاده لفيرس سي عن طريق اختبار الاليزا ثم الاستخلاص الآلي للحمض النووي الريبي الفيروسي سي ومضاعقته في كل من عينه السيرم وعينه نقطه الدم المجفف.
وقد اوضجت النتائج ان 95% (49/ 50) من عينات نقطه الدم الجافه كانت ايجابيه مقارنه بعينات السيرم بالنسبه لوجود الحمض النووي الريبي لفيروس سي وسجلت نسبه حساسية 98٪ وخصوصية 100٪.وانه لا توجد فروق ذات دلاله احصائيه في كميه الحمض النووي الريبي لفيروس سي بين عينه السيرم ونقطه الدم الجاف بين المرضى .اما بالنسبه للمستويات المختلفة من الحمل الفيروسي، فقد لوحظ عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين العينتين عندما كان الحمل الفيروسي أقل او أكثر من 100000 وحدة دولية.
وباختصار يمكن القول بان استخدام نقطه الدم الجافه لتضخيم الحمض النووي الريبي سي، طريقه موثوق بها، حساسة، رخيصة, سهله ومناسبة لمتابعه المرضى. ويمكن استخدامها في الكشف عن فيروس سي لدى الاشخاص المعرضين للاصابه بصوره كبيره مما يزيد من امكانيه وسهوله التشخيص المبكر وبالتالي زيادة فرص الحصول على العلاج.

Article Details

Application of Dried Blood Spot Testing for Hepatitis C Virus RNA Amplification

Authors:

نهاد أحمد فؤاد | أحمد وجيه مهدي | شريف محمد الطاهر

Publisher:

The Egyptian Society of Medical Microbiology

Main Topics:

Medicine

Journal:

The Egyptian Journal of Medical Microbiology 2013 Vol.22 Issue 1, pp.1-8

Document Type:

Article

Publication Date:

1/2013

Document Language:

English

Document ID (Org No.):

49197

Frequency:

Quarterly

pISSN:

11102179

DOI:

10.12816/0004921

Descriptors:

LIVER DISEASES

INFECTIOUS HEPATITIS

RNA

VIRUSES

BLOOD TESTS

DIAGNOSIS

PATIENTS

THERAPY

Issues

Article Details

Authors: نهاد أحمد فؤاد | أحمد وجيه مهدي | شريف محمد الطاهر

Publisher: The Egyptian Society of Medical Microbiology

Main Topics: Medicine

Journal: The Egyptian Journal of Medical Microbiology 2013 Vol.22 Issue 1, pp.1-8

Document Type: Article

Publication Date: 1/2013

Document Language: English

Document ID (Org No.): 49197

Frequency: Quarterly

pISSN: 11102179

DOI: 10.12816/0004921

Descriptors:

Issues

Authors:

نهاد أحمد فؤاد | أحمد وجيه مهدي | شريف محمد الطاهر

Publisher:

The Egyptian Society of Medical Microbiology

Main Topics:

Medicine

Journal:

The Egyptian Journal of Medical Microbiology 2013 Vol.22 Issue 1, pp.1-8

Document Type:

Article

Publication Date:

1/2013

Document Language:

English

Document ID (Org No.):

49197

Frequency:

Quarterly

pISSN:

11102179

DOI:

10.12816/0004921