Simultaneous Determination of Acyclovir, Metoprolol and Phenol Red by a RP-HPLC Method for Intestinal Perfusion Studies

Müge ATEŞ; Mustafa Sinan KAYNAK; Selma ŞAHİN

Article Details

Simultaneous Determination of Acyclovir, Metoprolol and Phenol Red by a RP-HPLC Method for Intestinal Perfusion Studies

Authors:

Müge ATEŞ | Mustafa Sinan KAYNAK | Selma ŞAHİN

Publisher:

Hacettepe University

Journal:

Hacettepe University Journal of the Faculty of Pharmacy 2015 Issue 2, pp.146-161

Document Type:

Article

Publication Date:

5/2015

Document Language:

English

Document ID (Org No.):

2000454352

Frequency:

Quarterly

eISSN:

2458-8806

Abstract:

 

Intestinal perfusion  SPIP  technique is one of the most commonly used  techniques to determine the intestinal permeability of a drug. In perfusion  studies, metoprolol  as tartrate  and phenol red are widely used as a reference  compounds to evaluate the permeability coefficient of the compound of  interest  acyclovir in this study . The aim of our study was to develop and  validate a reversed-phase liquid chromatographic method for the simultaneous  determination of acyclovir, metoprolol and phenol red for use in intestinal  perfusion studies. The analysis was performed on a C18 column  4.6  mm x 250 mm, 5 μm  using a mobile phase consisting of methanol:0.0125  M potassium dihydrogen phosphate buffer  55:45, v/v; pH 7.0 . Method was  validated according to the FDA guidelines for selectivity, sensitivity, linearity,  precision, accuracy, stability. All calibration curves were linear  r2> 0.999 .  Lower limit of quantitation was 0.04 μg/mL for acyclovir, 0.02 μg/mL for  metoprolol, 0.01 μg/mL for phenol red. Detection limit was 0.01 μg/mL for  acyclovir 0.002 μg/mL for metoprolol, 0.003 μg/mL for phenol red. Precision  and accuracy results of the method fulfilled the required limits. This newly  developed and validated method can be readily used on a routine basis for  the standardization of in situ intestinal permeability experiments.

 

Barsak perfüzyon tekniği, bir ilacın barsaklardan permeabilitesini tayin  etmek amacıyla en çok kullanılan tekniklerden biridir. Perfüzyon çalışmalarında  incelenen maddenin  bu çalışmada asiklovir  permeabilite katsayısını  değerlendirmek amacıyla metoprolol ve fenol kırmızısı referans maddeler olarak  sıklıkla kullanılır. Bu çalışmanın amacı, barsak perfüzyonu çalışmalarında  kullanılmak için asiklovir, metoprolol ve fenol kırmızısının eş zamanlı  olarak tayin edileceği bir ters faz sıvı kromatografisi yöntemi geliştirmek ve  valide etmektir. Analiz bir C18 kolonunda  4.6 mm x 250 mm, 5 μm  metanol:  0.0125 M potasyum dihidrojen fosfat tampon  55:45, h/h; pH 7.0 ’ dan  oluşan mobil faz kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Yöntem FDA kılavuzuna  göre seçicilik, duyarlılık, doğrusallık, kesinlik, doğruluk ve stabilite için valide  edilmiştir. Tüm kalibrasyon eğrileri doğrusaldır  r2> 0.999 . Kantitatif  olarak tayin edilebilir en küçük değer asiklovir için 0.04 μg/mL, metoprolol  için 0.02 μg/mL, fenol kırmızısı için 0.01 μg/mL’dir. Saptayabilme sınırı  asiklovir için 0.01 μg/mL, metoprolol için 0.002 μg/mL, fenol kırmızısı için  0.003 μg/mL’dir. Kesinlik ve doğruluk sonuçları talep edilen sınırları karşılamıştır.  Yeni geliştirilen ve valide edilen bu yöntem in situ barsak permeabilite  deneylerinde rutin olarak kolayca kullanılabilir.

Article Details

Simultaneous Determination of Acyclovir, Metoprolol and Phenol Red by a RP-HPLC Method for Intestinal Perfusion Studies

Authors: Müge ATEŞ | Mustafa Sinan KAYNAK | Selma ŞAHİN

Publisher: Hacettepe University

Journal: Hacettepe University Journal of the Faculty of Pharmacy 2015 Issue 2, pp.146-161

Document Type: Article

Publication Date: 5/2015

Document Language: English

Document ID (Org No.): 2000454352

Frequency: Quarterly

eISSN: 2458-8806

Issues

Authors:

Müge ATEŞ | Mustafa Sinan KAYNAK | Selma ŞAHİN

Publisher:

Hacettepe University

Journal:

Hacettepe University Journal of the Faculty of Pharmacy 2015 Issue 2, pp.146-161

Document Type:

Article

Publication Date:

5/2015

Document Language:

English

Document ID (Org No.):

2000454352

Frequency:

Quarterly

eISSN:

2458-8806